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Protocolli di etanolo

Protocolli di etanolo


Etanolo, anche chiamato alcol etilico o bere alcolici, è ottenuto dalla fermentazione di cereali o di trasformazione di petrolio greggio. Questo alcool viene utilizzato nei laboratori di biochimiche per disidratare i campioni delle cellule, proteine e altre molecole nelle soluzioni organiche e nel riconoscimento di DNA archeologico separate. Protocolli di etanolo includono precipitazione dell'etanolo, fissazione dell'etanolo di campioni per l'archiviazione a lungo termine ed estrazione di DNA PCR-amplificabile.

Precipitazione dell'etanolo

Questo metodo viene utilizzato in un laboratorio per purificare e concentrare soluzioni contenenti proteine e polisaccaridi con etanolo al 95 per cento. Secondo Fred Hutchinson Cancer Research Center, i campioni sono centrifugati prima a 1000 rpm per 20 secondi, poi a 3500 giri per 45 secondi. Tecnici aggiungere etanolo, mescolando bene e mettere la soluzione in freezer per circa 20 minuti. Dopo di che, i campioni sono centrifugati nuovamente per 45 minuti e lasciato asciugare all'aria per 30 minuti. Tecnici di aggiungere acqua deionizzata prima di riporlo nel freezer.

Fissazione dell'etanolo di campioni per l'archiviazione a lungo termine

Questo protocollo utilizza il 70 per cento di etanolo a-4 gradi Fahrenheit per disidratare e curare le cellule per l'archiviazione a lungo termine. Altre sostanze utilizzate in questo metodo includono il citrato di sodio, Triton - X100, ioduro di propidio, ribonucleasi A e acqua distillata, segnala il flusso Cytometry Core laboratorio presso la UCLA. I tecnici Centrifugare le provette contenenti celle di campione per cinque minuti, quindi rimuovere il liquido sulla superficie. Essi aggiungere 1 ml di etanolo agitando il tubo. In seguito, le cellule sono conservate a-4 gradi Fahrenheit per osservazione successiva e utilizzano.

Estrazione del DNA PCR-amplificabile

Estrazione del DNA PCR-amplificabile è un protocollo basato su precipitazione semplice etanolo utilizzato nella preparazione del DNA dalle ossa umane antiche. Secondo un articolo pubblicato in "Nucleic Acids Research," utilizzando questo metodo, gli scienziati possono recuperare campioni di DNA da 1.200 anni di ossa umane. Tecnici di seguono i passaggi di base del protocollo di precipitazione dell'etanolo, l'aggiunta di una sostanza chiamata Blue destrano. Più tardi, usano una tecnica scientifica chiamata reazione a catena della polimerasi (PCR) per amplificare i campioni di DNA.