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Protocollo di transfezione di luciferase

Protocollo di transfezione di luciferase


Bioluminescenza Firefly ha sempre catturato l'immaginazione umana. Nel 1986, i ricercatori all'Università di California, San Diego, catturato il processo genetico e chimico per uso dai biologi molecolari. Hanno trovato quel luciferasi di lucciola converte luciferina oxy-luciferasi e produce la bioluminescenza.

Definizioni

Un gene - una sequenza di acido desossiribonucleico (DNA) in cellule-- produce una proteina specifica, in questo caso luciferasi. Il gene della luciferasi può essere isolato e messo in un piccolo pezzo di DNA - un plasmide - di transfezione in una cella. Un promotore è una sequenza di DNA che controlla la quantità di prodotto da gene della luciferasi.

Metodi

Metodi di transfezione - modi di mettere i plasmidi in cellule-- possono variare secondo l'esperimento. Sali, lipidi e forza elettrica sono modi per creare fori che permettono il plasmide di luciferase entrare nella cellula e produrre luciferasi. I reagenti necessari possono essere effettuati in laboratorio o acquistati come kit.

Utilizza

L'analisi del reporter di luciferase è utilizzato dai biologi molecolari per caratterizzare la forza di differenti promotori in plasmidi luciferasi. La quantità di bioluminescenza prodotta dopo la transfezione è proporzionale alla forza del promotore, che è importante nella ricerca e industria dove la produzione aumentata della proteina è vantaggiosa.